HBsAg 的酶免疫检验方法根据反应模式分为“一步法”和“两步法”。“一步法”是将待测样品和酶标记抗体同时加入到反应孔中进行反应，从反应开始到反应结束大约需要 1 个小时，而“两步法”则是先将样品加入到反应孔中，待反应结束后再加入酶标记抗体，从而使得待测样品的“捕获反应”和酶标记抗体的“酶联反应”分开进行，从反应开始到结束大约需要 2 个小时。两步法较一步法相比大大延长了检测时间，降低了检测效率，不利于基层医院的广泛推广。由于 HBeAg 多见于 HBsAg 阳性的患者血清，HBeAg 的检出是 HBV 在体内复制及血清具有强感染性的一个指标，血中 HBsAg 的滴度越高 HBeAg 的检出率亦越高。HBeAg 阳性可以作为一步法测 HBsAg 是否出现鈎镰效应的一个判断指标。

1. 资料与方法

1.1 一般资料

已诊断为慢性乙肝患者的血清标本 200 份来自我院 2010 年门诊及住院病人以及肝病医院，372 份血液标本来自我院 2010 年体检者，186 份阴性对照标本来自我院门诊体检者。

1.2 试剂与仪器

试剂由北京万泰生物药业有限公司提供；酶标仪 KHBST——360，洗板机 DNX—— 9620A 系北京普朗新技术有限公司产品。

1.3 方法

严格按照双抗体夹心“一步法”及“两步法”的操作规程进行操作。

2. 结果

(1)2 种方法检测 758 份血清 HBsAg 结果，见表 1

(2)2 种方法的灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率结果 (表 2)

                     

3. 讨论

将 372 例体检者标本分别用一步法和两步法检测，其阳性结果和阴性结果个数及其对应标本的结果是完全吻合的；另外将其中 24 例阳性标本检测其 HBeAg 结果均为阴性。而上述 200 例乙肝患者标本用一步法测出阴性的 2 例再进一步检测 HBeAg，发现其 HBeAg 为阳性，这便是一步法因鈎镰效应引起的 HBsAg 假阴性。从上表还可以知道一步法和两步法检测的特异度和假阳性率均相同，即二者的误诊率均为零。因此本人认为，2011 年国家强制将两步法取代一步法，虽然一定程度降低了鈎镰效应提高了检出率，但大大延长了 HBsAg 的检测时间降低了检测效率，这是检验同仁们不愿看到的；为了提高检测效率，方便就诊较远的同志能当天取得报告，同时发现鈎镰效应引起的假阴性，可以用一步法联合检测 HBeAg。当然对于足以引起鈎镰效应的高浓度的 HBsAg，为了有利于临床诊疗和治疗效果的监测，可以用灵敏度更高的电化学发光和时间分辩荧光免疫检测进行定量或半定量。由于电化学发光和时间分辩荧光免疫检测大大增加了检测成本，加重了就医负担，对于需治疗的乙肝患者进行临床治疗效果的监测来说是很必要的，但对于绝大多数不用临床治疗的乙肝携带者及健康体检者来说却是没有多大的必要。本人通过大量临床实践认为，对于两对半检测的标本可以先用一步法检测其 HBsAg，如果 HBeAg 阳性而 HBsAg 为阴性则是因抗原浓度太高致鈎镰效应引起的假阴性，此时可以用灵敏度更高的电化学发光和时间分辩荧光免疫检测进行定量或半定量以准确测出其 HBsAg 的含量，便于临床治疗及疗效观察；而对于随诊及体检两对半者只需进行双抗体夹心一步法检测 HBsAg 就可以了；这样既降低了检测成本，同时也大大缩短了检测时间，适合在基层医院广泛开展。